血清蛋白手性色谱柱操作说明书
1.使用前注意事项
1) 色谱柱出厂保存在0.02% 的NaN3水溶液中,使用前须先用超纯水以0.8 mL/min的流速冲洗色谱柱半小时,然后再换成分析样品所需的流动相;
2) 接入色谱柱前,必须用超纯水对色谱仪器系统进行冲洗,冲洗干净后再接上色谱柱;对可能含有有机溶剂的泵排液时,需取出色谱柱空排;
3) 该手性柱只适用于反相体系。
2.参考操作条件
柱 型
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150 ? 4.6 mm ,分析柱
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250 ? 4.6 mm ,分析柱
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流动相方向
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参照色谱柱标签上的箭头
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典型流速
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1.0 mL/min,不要超过1.2 mL/min
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1.0 mL/min,不要超过1.2 mL/min
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柱压范围
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< 8.0 MPa (约1160 psi),不要超过10.0 MPa (约1450 psi)
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温 度
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20 ~40 ℃
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建议有机相比例
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≤5%,不要超过10%
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PH值范围
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5.0-8.0
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3、流动相
醇类/水
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乙腈/水
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5/95到0/100
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5/95到0/100
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反相流动相
1)反相流动相一般使用甲醇/水、乙腈/水,流动相允许的最高有机相比例为10%,最高的水相比例为100%;
2)当需要使用缓冲溶液时,缓冲液的浓度不宜太高,离子强度应控制在0~100 mM范围内;
3)色谱柱可承受的缓冲溶液PH范围为5.0-8.0,超过该范围时会降低色谱柱的寿命。
4、色谱柱保养
1) 强烈建议使用保护柱;
2) 流动相需使用新鲜的超纯水、色谱纯溶剂,现配现用;使用前需用0.2 mm滤膜过滤和超声脱气处理;
3) 尽量用流动相溶解样品。对于不溶于水的样品,用其他溶剂溶解后需用流动相稀释才可进柱分析,在进样前需过滤样品溶液;
4) 若流动相中不含缓冲盐组分,用20 mL 0.02%NaN3的水溶液冲洗后,放入冰箱内4 oC下保存;
5) 若流动相中含有缓冲盐,使用完毕后需马上用超纯水(不少于30 mL)把色谱柱内的缓冲液冲洗干净,再用20 mL 0.02%的NaN3水溶液冲洗,放入冰箱内4oC 下保存;
6) 建议不要长期在极端条件下使用色谱柱,以避免色谱柱使用寿命变短。